д-р Питер Маккалоу, птичий грипп произведён в Америке

Цитата: Hulscher N, Leake J, McCullough PA (2024). Проксимальное происхождение эпидемического высокопатогенного птичьего гриппа H5N1 Clade 2.3.4.4b и его распространение перелетными водоплавающими птицами. Poult Fish Wild Sci. 12:286.

В социальных сетях и в интервью по телевидению очень резкие заявления о происхождении циркулирующего в настоящее время птичьего гриппа делаются командой, состоящей из клинического кардиолога-нефролога, автора криминальных романов и магистра общественного здравоохранения, окончившего в 2024 году специальность эпидемиология. Ни один из этих авторов не имеет никакой подготовки или опыта в вирусологии, анализе последовательностей, вирусной эволюции или геопространственном отслеживании вирусной эволюции.

Если это правда, утверждения о том, что штамм H5N1, циркулирующий в настоящее время в Соединенных Штатах, был создан в лаборатории Министерства сельского хозяйства США в Афинах, штат Джорджия, и (одновременно, независимо?) в медицинском центре Erasmus в Роттердаме, Нидерланды, были бы взрывоопасными, усилили бы страх у широкой общественности и, безусловно, увеличили бы недоверие как к Министерству сельского хозяйства США, так и к другим спонсируемым правительством США исследованиям в области вирусологии.

Если это ложь, это был бы ещё один явный пример психологического биотерроризма, особенно если были бы выявлены какие-либо связанные с этим конфликты интересов.

Доктор Питер Маккалоу: «Текущий штамм птичьего гриппа является продуктом исследований по приобретению функций, проведенных в Исследовательской лаборатории по птицеводству Министерства сельского хозяйства США в Афинах, штат Джорджия. Так что это проблема, созданная человеком, с которой сейчас сталкиваются наши фермы. Это есть в рецензируемой литературе, и, я имею в виду, это действительно, знаете ли, следующие шаги в этой вспышке — это то, чтобы люди поняли, знаете ли, последствия этого лично и как подготовиться». «Это циркулирующая клада, которая является видом исходного штамма, клада 2.3.4.4b, и, опять же, это продукт так называемого исследования по приобретению функций серийным пассажем, проведенного в Исследовательской лаборатории по птицеводству Министерства сельского хозяйства США». «Ему помогали Школа ветеринарной медицины Висконсинского университета и Роттердамский университет. Приобретение функций заключалось в том, чтобы заставить его распространиться от кур к перелетным водоплавающим птицам или кряквам. И вот как он сейчас распространяется по всему миру». «Он распространяется уже 4 года. Он постоянно повторно заражает фермы, потому что кряквы летают вокруг, приземляются в прудах на фермах и легко заражают других животных на ферме. Так что он смог, в некотором смысле, расширить круг хозяев даже на крупный рогатый скот и морских млекопитающих». «Теперь хорошая новость в том, что он намного мягче, чем птичий грипп десятилетия назад, и затем есть рецензируемая статья Ника Халшера на эту тему. И, вы знаете, и это не было опровергнуто Центром исследований птицеводства Министерства сельского хозяйства США». «Фонд Маккалоу посетил саммиты по птичьему гриппу как в Университете Арканзаса, так и в Вашингтоне, округ Колумбия. Так что отрицать этого нельзя. Так же, как и COVID-19, проблема птичьего гриппа — это проблема, созданная человеком правительством США».

Публикация получила чрезвычайно быстрое рассмотрение и была затем оперативно опубликована — менее чем через месяц между назначением редактору и фактической датой публикации. Для меня, как для человека, который рецензировал множество статей и был главным редактором журнала о вакцинах, это крайне необычно и предполагает риск того, что обзор был поверхностным.

Получено: 03.10.2024, рукопись № PFW-24-34400; Редактор назначен: 07.10.2024, предварительный контроль качества № PFW-24-34400 (PQ); Рассмотрено: 21.10.2024, контроль качества № PFW-24-34400 ; Исправлено: 28.10.2024, рукопись № PFW-24-34400 (R); Опубликовано: 04.11.2024, DOI: 10.35248/2375-446X.24.12.286

Ключевые элементы этой недавней публикации включают в себя:

Абстрактный

«Значительные мутации, обнаруженные в недавних случаях заболевания людей, указывают на возможные связи с экспериментами по последовательному прохождению. Однако причинно-следственная связь не установлена и срочно необходимы дальнейшие исследования для подтверждения этих результатов и выявления всех лабораторных утечек H5N1, которые могли произойти, с акцентом на крякву и других перелетных водоплавающих птиц, которые могут заразить большое количество птицеводческих и животноводческих хозяйств по всему миру».

Заключение

«Ближайшими источниками высокопатогенного птичьего гриппа H5N1 Clade 2.3.4.4b могут быть Юго-восточная лаборатория исследований птицеводства Министерства сельского хозяйства США (SEPRL) в Афинах, штат Джорджия, и Медицинский центр Эразма в Роттердаме, Нидерланды . Генетические данные и исторический контекст свидетельствуют о том, что лабораторная деятельность, включая серийные пассажи и исследования GOF, могла способствовать появлению H5N1 clade 2.3.4.4b. Однако причинно-следственная связь не установлена , и срочно необходимы дальнейшие исследования для подтверждения этих результатов и выявления всех лабораторных утечек H5N1, которые могли произойти, с упором на крякву и других перелетных водоплавающих птиц, которые могут заразить большое количество птицеводческих и животноводческих объектов по всему миру.

Обратите внимание на оговорки — эта статья никоим образом не «доказывает» ничего. В лучшем случае представленные гипотезы являются спекулятивными и довольно тревожными. Происхождение может быть… Предположите, что лабораторная деятельность… могла способствовать… причинно-следственная связь не установлена.

Это не строгое научное исследование, это гипотеза. Она ничего не доказывает. Существует множество альтернативных гипотез о происхождении текущего генотипа и фенотипа циркулирующего в настоящее время штамма H5N1 (птичий грипп). Это одна из многих, и как таковая, безусловно, заслуживает некоторого исследования, но эта рукопись никоим образом не доказала гипотезу авторов.

Ни один из этих авторов не является «ведущим ученым», обладающим экспертизой в этой области.

Это должно установить мою добросовестность относительно этого типа исследований для любых скептиков. Я обученный, часто публикуемый и часто цитируемый молекулярный биолог и вирусолог. Мои рейтинги Google Scholar в этих и смежных областях эквивалентны рейтингам старшего полного профессора.

Вот один из примеров того, как эксперты использовали кладистическое геопространственное отслеживание для отслеживания эволюции H5N1:

Это высокоспециализированная, технически сложная и требующая большого объема вычислений работа. Это не то, чему обучена или квалифицирована команда, состоящая из кардиолога-нефролога, настоящего писателя криминальных романов и недавно получившего степень магистра общественного здравоохранения/эпидемиолога.

Имеются ли в данной публикации раскрытые или иным образом затронутые какие-либо соответствующие конфликты интересов (COI)?

В наши дни большинство журналов требуют строгого и полного раскрытия потенциальных конфликтов интересов. Никакого формального раздела COI или декларации не предусмотрено. Все три автора указаны как аффилированные с McCullough Foundation.

Ни в списке, ни в раскрытии не указано, что старший автор является председателем научного совета и ключевым сотрудником The Wellness Company . The Wellness Company продаёт неразрешенные FDA фармацевтические продукты и « комплекты экстренной помощи при заражении », разработанные старшим автором и как утверждается, призванные смягчить последствия заражения различными вирусами. Как минимум, это выглядит как финансовый конфликт интересов со стороны старшего автора.

Имеются ли недавние обзорные публикации, также посвященные происхождению клады H5N1 2.3.4.4?

Да, есть. Вот один из Американского общества микробиологии :

Ниже приведено заявление о конфликте интересов из этой обзорной статьи, иллюстрирующее современные стандарты раскрытия информации о конфликте интересов:

Какова реальная история высокопатогенного вируса птичьего гриппа в мире и в США?

Цитата из «Птичий грипп A (H5N1) у молочного скота: происхождение, эволюция и межвидовая передача». Соответствующие ссылки см. в этой связанной публикации:

Вирусы гриппа подразделяются на четыре рода, а именно Alphainfluenzavirus (вирус гриппа A [IAV]), Betainfluenzavirus (вирус гриппа B [IBV]), Gammainfluenzavirus (вирус гриппа C [ICV]) и Deltainfluenzavirus (вирус гриппа D [IDV]) ( Рис. 1a ). Сезонные эпидемии у людей возникают ежегодно из-за инфекций, вызванных человеческими IAV и IBV. В отличие от IBV, который, как полагают, за некоторыми возможными исключениями, ограничен людьми, IAV, как установлено, поражает несколько видов животных, включая свиней, лошадей, морских млекопитающих, собак, летучих мышей, домашнюю птицу и несколько видов диких птиц. Инфекции ICV могут привести к легкому заболеванию человека, и не считается, что они вносят основной вклад в тяжелое респираторное заболевание у людей, в отличие от IAV и IBV. Инфекция IDV в основном встречается у крупного рогатого скота, естественного резервуара, при этом не было зарегистрировано ни одного случая заражения человека ( 1 , 2 ). Тем не менее, данные свидетельствуют о том, что IDV может привести к заражению рабочих из-за профессионального контакта с инфицированным крупным рогатым скотом ( 3 , 4 ). Все пандемии гриппа были вызваны новыми реассортантами IAV, включающими предшественников вирусов птичьего гриппа (AIV).

ЭКОЛОГИЯ И ЭВОЛЮЦИЯ HPAIV H5N1 КЛАДЫ 2.3.4.4B

С момента появления высокопатогенного вируса птичьего гриппа (HPAIV) A/goose/Guangdong/1/1996 (Gs/Gd) H5N1 в Китае, линия Gs/Gd HPAIV H5Nx распространилась по всему миру через перелетных диких птиц, заражая различные виды и представляя угрозу для здоровья животных и людей ( 1 ). Между тем, Gs/Gd типа H5 эволюционировал в 10 отдельных кладов (0–9), и некоторые из этих кладов далее подразделяются на различные подклады ( 11 ). В конце 2013 года клад 2.3.4.4 HPAIV H5N8 появился в Китае и вскоре распространился в начале 2014 года в Южную Корею и Японию ( 12 ). Позднее в 2014 году вирус далее передавался по разным путям пролета, вызывая множественные вспышки среди домашних и диких птиц в Азии, Европе и Северной Америке ( 13 ). Между тем, вирус претерпел множественные события реассортации с другими AIV, что привело к появлению нескольких подтипов H5Nx (например, H5N1, H5N2, H5N5 и H5N6) с восемью субкладами (2.3.4.4a–2.3.4.4h) ( 14 – 16 ). В 2020 году на Ближнем Востоке появился новый реассортант HPAIV H5N1 клада 2.3.4.4b, который к 2021 году стал наиболее преобладающим реассортантом/вариантом в Азии, Европе и Африке ( 17 ). В декабре 2021 года HPAIV H5N1 продолжил распространяться через перелетных птиц через Атлантический океан из Европы в Северную Америку, что привело к нескольким вспышкам среди популяций домашней птицы ( рис. 1b ) ( 18 ). Вскоре после этого HPAIV H5N1 клад 2.3.4.4b достиг Центральной и Южной Америки и часто регистрировался у сельскохозяйственных животных, нескольких млекопитающих, включая людей и морских животных, и животных, находящихся на открытом воздухе ( 13 , 19–21 ) . Этот широкий круг хозяев и множественные межвидовые инфекции HPAIV H5N1 у диких и домашних животных недавно были расширены после продолжающейся и беспрецедентной эпизоотии у молочного скота (коров). За исключением норок, морских млекопитающих и коров, инфекции млекопитающих HPAIV H5N1 не были задокументированы как приводящие к передаче от млекопитающего млекопитающему ( 22–24 ) . Это подчеркивает важность трех видов животных, особенно молочных коров, как потенциальных факторов появления вариантов HPAIV H5N1 , которые могут легко передаваться среди людей.

До недавнего времени крупный рогатый скот считался маловероятным хозяином для HPAIV H5N1 из-за значительных различий в физиологии их дыхательных путей по сравнению с птицами. Однако недавнее исследование показало, что птичьи SA-α2,3-Gal-β1,4 и SA-α2,3-Gal-β1,3 присутствуют в молочной железе, дыхательных путях и головном мозге мясного и/или молочного скота. Это открытие дает обоснование наблюдаемой склонности HPAIV H5N1 к заражению и репликации в молочных железах ( 25 ). Поскольку вирус, по-видимому, не заражает коров эффективно через дыхательные пути, большинство доказательств указывают на передачу от коровы к корове при использовании тех же доильных аппаратов, которые, будучи загрязненными инфицированным молоком, могут инокулировать вирус в молочную железу неинфицированной коровы во время процесса доения ( 26 ). В этом сценарии не указано, каким образом вирус впервые проник в ткань молочной железы коровы, но можно предположить, что, возможно, доильное устройство было заражено HPAIV H5N1 от инфицированной птицы, что инициировало цепочку передачи вируса от коровы к корове.

С момента своего появления в конце 2020 года HPAIV H5N1 clade 2.3.4.4b стал причиной эпизоотий по всему миру в Европе, Африке, Азии и Америке ( 27 , 28 ), а также разделился на несколько генотипов, циркулирующих среди нескольких видов птиц, и продемонстрировал способность заражать более 30 видов млекопитающих спорадическими случаями заболевания людей ( 29 ). Происхождение HPAIV H5N1 clade 2.3.4.4b прослеживается как новый реассортант между H5N8 clade 2.3.4.4b и другими подтипами IAV ( 30 ). Примечательно, что HPAIV H5N1 clade 2.3.4.4b продемонстрировал существенное географическое распространение и адаптацию к хозяину, что способствовало его распространению на различных континентах через маршруты перелетных птиц. К концу 2021 года евразийский штамм HPAIV H5N1 клады 2.3.4.4b проник в Северную Америку через диких птиц и впоследствии был обнаружен у различных видов млекопитающих.

В 2024 году первые изоляты HPAIV H5N1 от молочного скота в Техасе имели почти идентичные последовательности генома и были идентифицированы на основе филогенетического анализа как клад 2.3.4.4b генотип B3.13, реассортант минорного генотипа B3.9 реассортанта атлантического HPAIV H5N1 клада 2.3.4.4b (генотип A1) ( 24 ). Этот генотип B3.13 появился в конце 2023 года в результате реассортации между евразийскими линиями диких птиц H5N1 (сегменты генов PA, HA, NA и M) и американскими линиями диких птиц, не являющихся H5N1 (сегменты генов PB2, PB1, NP и NS) ( рис. 2a ) ( 24 , 31 ). Несколько недель спустя, HPAIV H5N1 clade 2.3.4.4b генотип B3.13 был зарегистрирован на нескольких молочных фермах в других районах Соединенных Штатов, представляя собой многоштатную эпизоотию ( 32 ). Примечательно, что реассортантный вирус HPAIV H5N1 clade 2.3.4.4b генотип B3.13, вовлеченный в вспышку заболевания у молочного скота в Соединенных Штатах, до сих пор не был обнаружен в Европе. Аналогичным образом, никаких других реассортантов из Евразии и Северной Америки не было зарегистрировано в Европе, несмотря на обнаружение этих вирусов в Канаде и Соединенных Штатах с 2014 года.

Различные мутации в субъединицах HA и полимеразы, которые, скорее всего, облегчают проникновение и репликацию вируса, соответственно, в новых клетках-хозяевах млекопитающих, были выявлены у молочного скота HPAIV H5N1 ( таблица 1 ) ( 32 ). Было обнаружено, что эти мутации усиливают сродство связывания с рецепторами сиаловой кислоты (SA), распространенными в верхних дыхательных путях млекопитающих, тем самым позволяя вирусу пересекать виды и заражать млекопитающих. Кроме того, также наблюдались изменения в белке NA, который способствует высвобождению вновь образованных вирусных частиц из инфицированных клеток-хозяев, что, скорее всего, способствует повышению эффективности репликации и передачи у коров ( 30–32 ). Эти изменения могут не только повысить способность HPAIV H5N1 вызывать инфекции у крупного рогатого скота, но и могут повысить его потенциал распространения от крупного рогатого скота к другим млекопитающим. Это вызывает серьезные опасения по поводу здоровья как животных, так и людей.

Какова же на самом деле ранняя история? Где и когда впервые был обнаружен H5N1 (птичий грипп)?

Обратите внимание на принадлежность автора. Старший автор из той самой лаборатории, которая, как утверждает статья Халшера и др., является недавним источником циркулирующего в настоящее время вируса H5N1.

Исторически первым вирусом птичьего гриппа, выявленным у птиц, был вирус высокопатогенного птичьего гриппа, называемый вирус чумы птиц, который был первоначально выявлен в Северной Италии в 1880-х годах ( Kaleta and Rulke 2008 ).

Случаи чумы птиц с 1880-х по 1959 год были вызваны исключительно вирусами H7N7 и H7N1 HPAI, но в 1959 году у кур в Шотландии появился первый вирус H5 HPAI, H5N1 ( Kaleta and Rulke 2008 ; Swayne et al. 2020 ). С 1880-х по 1959 год чума птиц распространилась по всей Европе, Азии и Африке и была зарегистрирована в Северной и Южной Америке.

Начиная с 1959 года, при наличии хорошо поддерживаемых уникальных изолятов вируса в архивах, вспышки, вызванные вирусами HPAI, в основном возникали из-за изменений вирулентности вирусов LPAI с ограниченным распространением и искоренением среди домашней птицы с помощью программ ликвидации. Главным исключением была линия A/goose/Guangdong/1/1996 (Gs/GD) H5, которая возникла в 1996 году и распространилась и сохранилась среди домашней птицы и водоемов диких водоплавающих птиц до настоящего времени, вызывая инфекции у домашней птицы, диких птиц или людей в 84 странах Азии, Африки, Европы и Северной Америки ( Röhm et al. 1995 ; Swayne et al. 2020 ).

Механизмы, посредством которых вирусы H5/H7 LPAI превращаются в вирус HPAI, включают мутацию, вставку и рекомбинацию в протеолитическом сайте расщепления HA. HA — это поверхностный гликопротеин вируса AI, отвечающий за прикрепление вируса к рецептору клетки-хозяина для инициирования жизненного цикла инфекции. После того, как вирус попадает в клетку, начинают вырабатываться новые вирусы, включая неактивный предшественник белка HA (HA0). HA0 расщепляется в протеолитическом сайте расщепления клеточными протеазами хозяина с образованием функциональных субъединиц HA1 и HA2, в результате чего образуется инфекционный вирус. Область сайта расщепления в HA0 состоит из остатка аргинина (R), прилегающего к консервативному глицину (G) ( Garten and Klenk 1983 ; Swayne et al. 2020 ). Число основных аминокислот в месте расщепления HA играет решающую роль в вирулентности, определяя, какие протеазы расщепляют HA0 и, следовательно, в каких типах клеток и тканях хозяина могут реплицироваться вирусы AI ( Bosch et al. 1981 ; Kawaoka et al. 1987 ; Horimoto and Kawaoka 1994 ; Swayne et al. 2020 ). Во-первых, место расщепления HA вируса AI можно классифицировать как одноосновное (например, PEKQTR/GLF) или многоосновное (например, PQRKKR/GLF). Одноосновный сайт расщепления обычно содержит одну или две непоследовательные основные аминокислоты, аргинин (R) или лизин (K), в критическом положении и расщепляется трипсином или трипсиноподобными протеазами, которые ограничивают репликацию вируса в эпителиальных клетках дыхательных и желудочно-кишечных трактов ( Suarez 2016 ; Swayne et al. 2020 ). Вирусы H5/H7 LPAI сохраняют общий принцип одноосновного сайта расщепления, хотя у диких птиц эти подтипы имеют различные паттерны аминокислот в сайте расщепления ( Suarez 2016 ). Вирусы H5 LPAI обычно кодируют последовательность QRETR/G, тогда как вирусы H7 LPAI обычно обладают последовательностью NPKTR/G в сайте расщепления. Увеличение количества основных аминокислот и/или удлинение участка протеолитического расщепления до минимального мотива из четырех основных аминокислот изменяют вирус до высокой вирулентности, позволяя расщеплению HA0 несколькими повсеместными клеточными протеазами (фуриноподобными протеазами), которые позволяют вирусу размножаться в клетках множества тканей, увеличивая потенциал вызывать системное заболевание и летальную инфекцию у куриных хозяев ( OIE 2019b ; Swayne et al. 2020).). Более конкретно, изменения, наблюдаемые в сайте расщепления HA вирусов HPAI, произошли из-за (a) замен неосновных аминокислот основными и в некоторых ситуациях сопровождались потерей экранирующего сайта гликозилирования, (b) вставок нескольких основных аминокислот из дублированных кодонов, (c) коротких вставок основных и неосновных аминокислот из неизвестного источника или (d) негомологичной рекомбинации с клеточными (например, РНК хозяина 28S) или вирусными РНК (например, РНК, кодирующая белок NP или M), которые удлиняют сайт протеолитического расщепления. Изменения (a), (b) и (c) наблюдались у вирусов H5/H7 HPAI, тогда как (d) наблюдалось только у вирусов H7 HPAI ( Suarez et al. 2004 ; Pasick et al. 2005 ; Maurer-Stroh et al. 2013 ; Swayne et al. 2020 ).

ЗАКЛЮЧИТЕЛЬНЫЕ ЗАМЕЧАНИЯ

Исторически первый вирус ИИ у птиц был идентифицирован в 1880-х годах как вирус HPAI (т. е. вирус чумы птиц). Сорок две задокументированные эпидемии или ограниченные вспышки HPAI произошли с момента открытия вирусов AI как причины чумы птиц в 1955 году. С 1959 года при хорошо поддерживаемых архивах вирусов большинство вирусов HPAI возникли из-за изменений в вирусах LPAI с ограниченным распространением вспышек и искоренением у домашней птицы. Однако вирусы Gs/GD H5Nx, мексиканский H7N3 и китайский H7N9 HPAI вызывают беспокойство, поскольку эти штаммы не были искоренены и по-прежнему вызывают вспышки у домашней птицы. В частности, вирусы Gs/GD H5Nx и китайский H7N9 представляют значительную пандемическую угрозу для здоровья человека. Линия Gs/GD H5 имеет широкое влияние One Health, поскольку она продолжает вызывать инфекции, болезни и смерть у домашней птицы, диких птиц и людей. Более того, вспышка вируса линии Gs/GD затронула больше домашних птиц и стран, чем 41 другая вспышка вируса HPAI вместе взятые.

Хотя вирусы HPAI кур произошли от вирусов LPAI диких водных птиц, возникновение вируса HPAI происходит не всегда. Механизмы, с помощью которых появился вирус H5/H7 HPAI, заключаются в мутации, вставке или рекомбинации в HA — более конкретно, в изменениях в сайте протеолитического расщепления. Количество основных аминокислот в сайте расщепления HA играет решающую роль в вирулентности, определяя, какие протеазы могут расщеплять HA и в каких тканях вирусы AI могут реплицироваться. В целом, механизмы вставки аминокислот в сайт расщепления, по-видимому, во многих случаях различны, и по этой причине генетическая основа для прогнозирования того, какие вирусы LPAI приведут к появлению вируса HPAI, остается неясной. Сообщается, что наличие или отсутствие N-связанных гликанов и ключевых остатков гистидина в HA влияет на фенотип вируса AI. Кроме того, изменения в других сегментах гена AIV могут увеличивать или уменьшать максимальную фенотипическую экспрессию HA, как правило, за счет повышения эффективности репликации и высвобождения. В целом, молекулярные методы, такие как секвенирование следующего поколения и обратная генетика, помогли выявить изменения, связанные с высокой вирулентностью. Однако необходимо значительное внимание к фундаментальным исследованиям, чтобы понять, почему изменения происходят только в определенных предшественниках LPAI, которые увеличивают их патогенность, что, как только будет понято, может повысить нашу способность предсказывать и впоследствии предотвращать события конверсии и потенциально привести к сокращению числа вспышек HPAI. С конечной целью искоренения, усиленное активное наблюдение, образование, биобезопасность, быстрые молекулярные и характеристические усилия предоставят наилучшую возможность для раннего обнаружения и ликвидации HPAI у домашней птицы.

Так был ли нынешний птичий грипп «сделан в Америке»?

Давайте подведём итоги:

Доктор Питер Маккалоу: «Нынешний штамм птичьего гриппа является продуктом исследований по приобретению функций, которые проводились в Лаборатории исследований птицеводства Министерства сельского хозяйства США в Афинах, штат Джорджия. Так что это проблема, созданная человеком, с которой сейчас сталкиваются наши фермы. Это есть в рецензируемой литературе, и, я имею в виду, это действительно, знаете ли, следующие шаги в этой вспышке — чтобы люди поняли, знаете ли, последствия этого лично и как к этому подготовиться».